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細胞在MVE液氮罐保存方法及步驟

時間:2019-04-17 10:19來源:未知 作者:ydgmve2020yyx 點擊:
隨著科技的進步 MVE液氮罐 也被眾多領域所應用,不管是生活中還是生產中都能看到它的身影,如醫療行業,生物醫學行業,金屬生產行業以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細胞在液
隨著科技的進步MVE液氮罐也被眾多領域所應用,不管是生活中還是生產中都能看到它的身影,如醫療行業,生物醫學行業,金屬生產行業以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細胞在液氮罐保存方法及步驟

一、MVE液氮罐的應用范圍及用途

1.在生物醫學行業中的應用:目前主要是用于牛、羊等優良種公畜以及珍惜動物的精液保存,以及遠距離的運輸和醫學中的疫苗、菌毒種、細胞以及人、動物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲存的液氮中,長期活性保存。

2.在金屬生產行業中的應用:利用成都金鳳液氮罐中儲存的液氮對金屬材料進行深冷處理,可以改變金屬材料的金相組織,顯著提高金屬材料的硬度、強度和耐磨性能。

精密儀器電子行業中的應用:將精密零件經過液氮深冷處理后進行裝配,提高零件裝配質量,從而提高設備或儀器的整機性能。

3.醫療衛生行業的應用:用液氮容器內儲存的液氮作為制冷劑進行手術,治療或冷藏冷凍細胞、組織等。冷療儀用于醫院臨床各科室能夠代替手術,安全無毒,無害痛苦少,不損害健康組織,殺菌效果良好。

4.美容領域的應用:主要用液氮的超低溫來處理皮膚表層。如采用手術治療,疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷,而冷凍治療卻不會出現這些情況,而且效果也比較理想。

二、細胞在液氮罐保存步驟:

怎么在液氮罐里儲存細胞呢?一般來講,凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作:

1、預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;

2、用胰酶對細胞進行消化:倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);

3、再次用完全培養液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化完全的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐最好;或者可以在4℃,2h;

三、細胞在MVE液氮罐的儲存分為兩種:

液氮罐里一般灌有低溫液氮,細胞的儲存需要低溫環境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環境。常規液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,有專用的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,完全浸入。使細胞完全處于液氮-196度環境下,才能夠長期保存細胞。

還有一種是氣相儲存,氣相儲存的話,溫度比液相儲存要高一些,不過也能達到-190度,對于細胞儲存來講,也是足夠了的。而且還能解決長期以來液相儲存細胞經常出現而又難以避免的一些問題,比如樣品污染,出罐爆管等等。相對來說,液相液氮罐相比氣相來說,相同體積的液氮罐保存的時間也久一些.氣相凍存的溫度稍微高一些,但相同體積的液氮罐保存的時間短一些(液氮量少,所以加液氮的頻率要高一些).氣相需要頻繁加液氮。
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