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細胞凍存原理及注意事項

時間:2019-09-03 09:21來源:未知 作者:ydgmve2020yyx 點擊:
細胞凍存保存細胞的主要方法 MVE液氮罐 細胞凍存是將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,這樣可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,以便需要的時候再復蘇細胞用于實驗
細胞凍存——保存細胞的主要方法  MVE液氮罐

細胞凍存是將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,這樣可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,以便需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件丟失細胞,起到了細胞保種的作用。

細胞凍存及復蘇的基本原理是慢凍快融,利用這一原理可以最大限度的保存細胞活力。

凍存的原理——慢凍:主要是防止細胞在冷凍過程中形成冰晶,對細胞造成損害;

復蘇細胞的原理——快融:主要是防止DMSO在液體狀態下對細胞的毒害作用,快速使細胞進入復蘇和生長狀態;

當細胞冷到零度以下,細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶;相反,結晶就大,大結晶會造成細胞膜、細胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。

注意事項:

1、從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存,但最好為對數生長期細胞。在凍存前一天最好換一次培養液;

2、將凍存管放入液氮灌或從中取出時,要做好防護工作,以免凍傷;

3、凍存和復蘇最好用新配制的培養液。

4、取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項特別重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。MVE液氮罐
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